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本生歸納總結：抗原抗體反應原理特點
抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行。抗原抗體反應的過程是經過一系列的化學和物理變化，包括抗原抗體特異性結合和非特異性促凝聚兩個階段，以及由親水膠體轉為疏水膠體的變化。
由于抗體主要存在于血清中，在抗原或抗體檢測中多以血清為試驗材料，故將體外抗原抗體的免疫學反應也稱作血清學反應(serological reaction)。該反應既可用已知的抗原檢測未知的抗體，這是臨床上常用的血清學診斷方法;也可用已知的抗體檢測未知的抗原，如微生物及其代謝產物、激素、藥物鑒定等的檢測
抗原抗體反應反應特點
抗原抗體反應的特點主要有四性：即特異性、比例性、可逆性，階段性。
特異性: 是抗原抗體反應的最主要特征，這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結構的互補性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應用。隨著免疫學技術的發(fā)展進步，還將在醫(yī)學和生物學領域得到更加深入和廣泛的應用，比如腫瘤的診斷和特異性治療等。
比例性: 是指抗原與抗體發(fā)生可見反應需遵循一定的量比關系，只有當二者濃度比例適當時才出現(xiàn)可見反應，在抗原抗體比例相當或抗原稍過剩的情況下，反應最，形成的免疫復合物沉淀最多、最大。而當抗原抗體比例超過此范圍時，反應速度和沉淀物量都會迅速降低甚至不出現(xiàn)抗原抗體反應。
可逆性: 是指抗原抗體結合形成復合物后，在一定條件下又可解離恢復為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反應是分子表面的非共價鍵結合，所形成的復合物并不牢固，可以隨時解離，解離后的抗原抗體仍保持原來的理化特征和生物學活性。
階段性：抗原抗體反應可分為兩個階段，第一個階段為抗原抗體的特異性結合階段，此階段是抗原與抗體間互補的非共價結合，反應迅速，可在數秒鐘至數分鐘內完成，一般不出現(xiàn)肉眼可見的反應現(xiàn)象。第二個階段為可見反應階段，是小的抗原抗體復合物間靠正、負電荷吸引形成較大復合物的過程。此階段反應慢，需要時間從數分鐘、數小時至數日不等，且易受多種因素和反應條件的影響 。
本生抗原抗體反應影響因素
電解質：抗原和抗體通常為蛋白質分子，等電點分別為pH 3～5和pH 5～6，在中性或:弱堿性的環(huán)境中，表面均帶負電荷，適當濃度的電解質會使他們失去一部分負電荷而相互結合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集或沉淀現(xiàn)象：在抗原抗體反應中，常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液，以提供適當濃度的電解質。
溫度：抗原抗體反應必須在適宜的溫度中進行，一般為15～40℃，通常最適為37℃。一定范圍內，溫度升高，可促進抗原抗體分子問的碰撞機會，加速抗原抗體復合物的形成，加快可見反應的速度，若溫度高于56℃，可導致已結合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞;溫度越低，結合速度越慢，但結合牢固，易于觀察。某些特殊的抗原抗體反應，對反應溫度有特殊要求，如冷凝集素在4℃左右與紅細胞結合最好，20℃以上反而解離。
酸堿度：抗原抗體反應必須在合適的酸堿度環(huán)境中進行，pH過高或過低都將影響抗原:抗體的理化性質，抗原抗體反應的最適酸堿度為pH 6～8。此外，當pH達到或接近顆粒性抗原的等電點時，即使沒有相應抗體存在時，也會引起抗原非特異性凝集，即自凝，造成假陽性反應，嚴重影響試驗的可靠性。
抗原抗體反應反應原理
抗體能特異性地識別相應的抗原，并與之結合。這種結合在體外也能發(fā)生，這種特性就是許多免疫檢測方法的基礎。抗原與抗體相互作用是非共價的，可逆的，其特性符合許多化學反應的基本原理。但因為抗體分子的結構特點，以及抗原分子結構的多樣性，使抗原抗體結合反應表現(xiàn)出復雜性 。
交叉反應
抗體特異性與交叉反應：抗體是特異的。只與相應抗原反應。實際制備的抗體卻常有非特異性反應，這是因為抗原不純造成的。多組分抗原之間存在共同的抗原決定簇，或者兩個抗原決定簇結構類似能與同一抗體結合，均可出現(xiàn)抗體與異源抗原的交叉反應。用瓊脂雙擴散能簡便直觀地反映不同抗原與同一抗血清，或不同抗血清與同一抗原的交叉反應。
本生抗原抗體反應應用
抗原：免疫動物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細菌或者其他蛋白質抗原，如果使用半抗原如小分子激素等，必須與大分子載體連接。抗原的用量視抗原種類及動物而異，—次注射小鼠可以少至幾個微克，免、羊甚至更大的動物每次注射的量就相應增加，從幾百μg/次至幾mg/次。
佐劑及乳化：佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放，以增加免疫刺激的效果。佐劑有和不佐劑之分。全佐劑加有滅活的分枝桿菌(如卡介苗)或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買，也可用羊毛脂和石蠟油按1：2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1：1的比例混合乳化為均勻的乳液，放置后不會發(fā)生油水分離。
免疫動物：常用于制備抗血清的動物如豚鼠、家兔、小鼠、大鼠等，如果大量生產可用動物羊、馬等，動物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0 mL，家兔為2—4mL。抗原免疫動物的途徑取決于動物種類、抗原特性和是否使用佐劑。腹腔注射(i.p)，肌肉注射(i.m)，皮內注射(i.d.)和皮下注射(s.c.)適合于任何抗原，這些途徑主要刺激局部淋巴結發(fā)生免疫應答，初次免疫和免疫加強注射均可使用。靜脈注射(i.v.)則只適合于可溶性抗原及分散的單細胞懸液，且不能使用佐劑，其誘發(fā)的免疫應答主要發(fā)生在脾臟。此外，在單克隆抗體制備時，亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法，尤其對微量抗原比較實用。體外免疫方法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時將脾細胞或外周血淋巴細胞(包括B細胞，T細胞及抗原遞呈細胞)與抗原一起作體外培養(yǎng)，然后再與骨髓瘤細胞融合。初次免疫后要經過2—3次以上的免疫加強以保證能形成較高水平的IgG抗體。兩次免疫注射之間的時間間隔，一般3—4周比較適合大部分動物，小動物可間隔10—14d，大動物則在2月左右。在免疫加強最后一次注射后的一周內采集抗血清，可獲得高水平的抗體 。
抗原抗體 本生生物公司供應：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。
